合肥市分子診斷試劑原材料標(biāo)準(zhǔn)
發(fā)布時(shí)間：2023-07-19 01:27:13
合肥市分子診斷試劑原材料標(biāo)準(zhǔn)
動(dòng)物疫病診斷的主要內(nèi)容有:一是對(duì)血、 尿、糞等進(jìn)行臨床常規(guī)化驗(yàn);二是從流行病學(xué)角度，調(diào)查研究動(dòng)物疫病流行情況，主要調(diào)查動(dòng)物發(fā)病時(shí)間及地點(diǎn)、疫病蔓延情況、疫情來(lái)源及傳播的途徑與方式等;三是從病理學(xué)方面，剖檢因忠傳染病而死亡的畜禽尸體，查看其病理變化，或者取病料進(jìn)行送檢，再進(jìn)一步做病理組織學(xué)方面的診斷;四是從微生物學(xué)角度，檢查、堅(jiān)定從患病的畜禽病料當(dāng)中分離并且培養(yǎng)出來(lái)的病原微生物，或者是進(jìn)行動(dòng)物接種試驗(yàn)等，五是從免疫學(xué)角度，對(duì)組織或者細(xì)胞的變態(tài)反應(yīng)、細(xì)胞的免疫功能及血清學(xué)反應(yīng)等進(jìn)行診斷。
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傳染病流行過(guò)程的三:個(gè)基本環(huán)節(jié):①傳染源。即傳染來(lái)源，就是被感染的動(dòng)物，包括傳染病病畜禽和帶菌(毒)動(dòng)物，如潛伏期帶菌(毒)、病愈后帶菌(毒)及健康動(dòng)物帶菌(毒)等。②傳播方式和途徑。有直接接觸傳播及間接接觸傳播。③易感動(dòng)物。就是對(duì)某種傳染病的病原體有易感性的動(dòng)物。
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Taq DNA聚合酶具有很高的加工合成特性，在適反應(yīng)溫度時(shí)，dNTP的摻入速度為35～100 nt/（s．酶分子），擴(kuò)增長(zhǎng)度可達(dá)7.6 kb。在低溫條件下，Taq DNA聚合酶的活性明顯降低，導(dǎo)致此酶在模板內(nèi)局部二級(jí)結(jié)構(gòu)區(qū)域的延伸能力受阻或前進(jìn)速率常數(shù)與解離常數(shù)的比值發(fā)生改變。在較高的溫度（95℃以上）時(shí)，很少有DNA合成；在體外，DNA在較高溫度時(shí)的合成速度受到引物或引物鏈與模板鏈雙鏈結(jié)構(gòu)穩(wěn)定性的限制。由于Taq DNA聚合酶的適反應(yīng)溫度高達(dá)75～80℃，故退火溫度和延伸溫度均可適當(dāng)提高，這限制了非特異性擴(kuò)增產(chǎn)物的出現(xiàn)，增加了PCR反應(yīng)的特異性。
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化驗(yàn)室診斷方法采用的檢測(cè)依據(jù)有以下幾種:①國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)以及農(nóng)業(yè)標(biāo)準(zhǔn);②動(dòng)物疫病檢測(cè)的其他規(guī)范:③化驗(yàn)室自行設(shè)定的檢測(cè)方法。不管采用何種方法，都需要考慮化驗(yàn)室自身的條件及樣品類型，如在對(duì)偽狂犬病進(jìn)行診斷時(shí)，實(shí)驗(yàn)室有酶標(biāo)儀，沒(méi)有基因擴(kuò)增儀，在診斷時(shí)檢測(cè)人員可采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)進(jìn)行診斷。如果送檢樣品為血清，檢測(cè)人員則可以采用酶聯(lián)吸附試驗(yàn)，而不需要采用動(dòng)物接種試驗(yàn)與病毒分離鑒定方法。
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全球，雖然只有少數(shù)的芯片可用于臨床診斷，但國(guó)內(nèi)基因芯片技術(shù)已經(jīng)處于世界領(lǐng) 跑的地位?；蛐酒夹g(shù)將是熒光定量PCR 檢測(cè)技術(shù)具挑戰(zhàn)的潛在對(duì)手，主要是：熒光定量PCR 技術(shù)一次只能檢測(cè)一個(gè)或幾個(gè)目標(biāo)基因，而基因芯片技術(shù)可以實(shí)現(xiàn)對(duì)大量目標(biāo)基因的同時(shí)檢測(cè)。隨著人類基因組計(jì)劃的進(jìn)展，基因芯片在國(guó)內(nèi)外已成為研發(fā)熱點(diǎn)。若基因芯片技術(shù)迅速成熟并大規(guī)模產(chǎn)業(yè)化，將對(duì)熒光定量PCR 檢測(cè)產(chǎn)生較大的沖擊。不過(guò)，基因芯片的大規(guī)模臨床應(yīng)用還存在尚未克服的技術(shù)缺陷，主要是由于芯片診斷特異性和靈敏度低、芯片診斷成本高昂和芯片診斷配套儀器價(jià)格昂貴等原因，預(yù)計(jì)熒光定量PCR 檢測(cè)技術(shù)在今后5 到10 年內(nèi)可保持前鋒。