四平市分子診斷試劑原材料標(biāo)準(zhǔn)
發(fā)布時(shí)間：2023-10-09 01:25:44
四平市分子診斷試劑原材料標(biāo)準(zhǔn)
熱啟動(dòng)Taq酶產(chǎn)品優(yōu)勢(shì);1. 靈敏度高：可直接擴(kuò)增1個(gè)拷貝的支原體DNA。2. 化學(xué)修飾，無(wú)動(dòng)物性DNA污染。3. 性?xún)r(jià)比高：相對(duì)市面上zui常用的熱啟動(dòng)聚合酶性?xún)r(jià)比更高。4. 擴(kuò)增效率高：熒光定量PCR起峰快，Ct值低，擴(kuò)增效率高。5. 可重復(fù)性高：熒光定量PCR擴(kuò)增曲線(xiàn)重合度高，受干擾影響少。熱啟動(dòng)Taq酶應(yīng)用：1. 熱啟動(dòng)PCR 2. 熒光定量PCR 3. DNA序列測(cè)定4. TA cloning.
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熱啟動(dòng)Taq酶的產(chǎn)生：在PCR的反應(yīng)過(guò)程中，主要有三個(gè)階段：變性、復(fù)性、延伸。Taq DNA聚合酶的復(fù)性溫度是72℃，但其在低溫下也有活性（活性較弱），也能催化引物與模板復(fù)性，只是錯(cuò)配率高，發(fā)生非特異性復(fù)性機(jī)率大。這樣在未達(dá)到72℃之前，反應(yīng)在Taq酶聚合下不斷擴(kuò)增出非特異性產(chǎn)物，而使實(shí)驗(yàn)失敗。在傳統(tǒng)的PCR反應(yīng)中，這樣由低溫上升至高溫的過(guò)程中，引物錯(cuò)配和二聚體的形成機(jī)率非常高，Hot Start Taq DNA聚合酶就是讓PCR反應(yīng)一開(kāi)始就在大于70℃下進(jìn)行。當(dāng)溫度較低時(shí)，酶活性被封閉，當(dāng)溫度大于一定溫度時(shí)酶又開(kāi)始工作。這樣就避免了在低溫下復(fù)性、延伸的過(guò)程，消除引物錯(cuò)配和二聚體形成，減少非特異性產(chǎn)物的產(chǎn)生。我們是如何對(duì)Hotstart Taq酶修飾而讓它只在高溫下才能發(fā)揮活性？這就是Hot Start taq酶的作用原理。
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傳染病的有關(guān)概念傳染:傳染是在- -定的外界條件下，動(dòng)物機(jī)體與侵入體內(nèi)的病原微生物相互斗爭(zhēng)所表現(xiàn)的不同程度的感受過(guò)程。病原微生物在動(dòng)物機(jī)體內(nèi)一定部位定居、繁殖，引起機(jī)體產(chǎn)生- - 系列病理反應(yīng)的過(guò)程。呈現(xiàn)出一- 定的臨床癥狀的傳染稱(chēng)為顯性傳染。反之，如果動(dòng)物不顯臨床癥狀，稱(chēng)為隱性傳染。傳染病:凡是由病原微生物引起，具有--定的潛伏期和臨床表現(xiàn)，并具有傳染性的疾病稱(chēng)為傳染病。敗血癥:病原體在機(jī)體的局部感染后，不斷繁殖并進(jìn)人血液，在f血液中繼續(xù)繁殖，產(chǎn)生毒素，引起各實(shí)質(zhì)器官的嚴(yán)重病變與全身反應(yīng)的綜合征。
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分子診斷主要是應(yīng)用分子生物學(xué)方法檢測(cè)生物體內(nèi)遺傳物質(zhì)的結(jié)構(gòu)或表達(dá)水平的變化而做出診斷的技術(shù)。由于分子診斷可以從基因?qū)哟芜M(jìn)行檢測(cè)，因此檢測(cè)靈敏度和準(zhǔn)確性的優(yōu)勢(shì)較為明顯，可在感染初期識(shí)別病毒或者提早確認(rèn)基因缺陷，從而提供個(gè)性化的醫(yī)療診斷服務(wù)，主要應(yīng)用于遺傳病、傳染性疾病、腫瘤等疾病的檢測(cè)與診斷。分子診斷主要包括 核酸診斷 和 生物芯片技術(shù) 。