揚州市實時熒光定量PCR儀研發(fā)
發(fā)布時間:2024-03-12 01:16:17
揚州市實時熒光定量PCR儀研發(fā)
熱啟動 Taq 酶的應(yīng)用:PCR 能夠快速特異的擴增任何已知的 DNA 片段,因此被廣泛的應(yīng)用于分子生物學(xué)的各個領(lǐng)域。Relia 熱啟動酶因具有 5’-3’核酸外切酶活性,可用于熒光定量 PCR 反應(yīng)。采用熱啟動法擴增是提高 PCR 特異性的常用方法,熱啟動酶是很好的選擇。除此之外,因其具有的高特異性高靈敏度被廣泛應(yīng)用到各個方面:構(gòu)建 cDNA 文庫,產(chǎn)生大量 DNA 測序,突變體分的析構(gòu)建,基因分離,遺傳病診斷,法醫(yī)鑒定等。

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大部分分子診斷實驗室的核心技術(shù)都主要集中在檢測特異性、相對較短的DNA或RNA片段上。該技術(shù)能診斷傳染性疾病、鑒別影響藥物代謝的特殊基因變異型或檢測與疾病有關(guān)的基因,如與癌癥有關(guān)的基因。這些檢測的核心是實時定量聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)、轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)擴增(TMA)、靶向擴增和信號擴增等類似技術(shù)的應(yīng)用。桑格排序和DNA片段分析或采用毛細電泳法的凝膠法都是分子診斷實驗室的關(guān)鍵技術(shù),但他們通常還包括檢測過程中的擴增步驟。為了能順利應(yīng)用那些采用DNA和RNA來診斷疾病的檢測,分子診斷實驗室須要使用定義明確的工作流程,從而得到穩(wěn)定的、有效的結(jié)果,而當(dāng)前已存在能幫助診斷實驗室實現(xiàn)每個工作流程流水化的特殊工具。

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全球,雖然只有少數(shù)的芯片可用于臨床診斷,但國內(nèi)基因芯片技術(shù)已經(jīng)處于世界領(lǐng) 跑的地位?;蛐酒夹g(shù)將是熒光定量PCR 檢測技術(shù)具挑戰(zhàn)的潛在對手,主要是:熒光定量PCR 技術(shù)一次只能檢測一個或幾個目標基因,而基因芯片技術(shù)可以實現(xiàn)對大量目標基因的同時檢測。隨著人類基因組計劃的進展,基因芯片在國內(nèi)外已成為研發(fā)熱點。若基因芯片技術(shù)迅速成熟并大規(guī)模產(chǎn)業(yè)化,將對熒光定量PCR 檢測產(chǎn)生較大的沖擊。不過,基因芯片的大規(guī)模臨床應(yīng)用還存在尚未克服的技術(shù)缺陷,主要是由于芯片診斷特異性和靈敏度低、芯片診斷成本高昂和芯片診斷配套儀器價格昂貴等原因,預(yù)計熒光定量PCR 檢測技術(shù)在今后5 到10 年內(nèi)可保持前鋒。

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在動物疫病診斷標準等技術(shù)規(guī)范中,酶聯(lián)免疫吸附試驗對試驗中加底物的反應(yīng)步驟進行規(guī)定,規(guī)定固定的時間,然后加終止液。但是,在許多酶聯(lián)免疫吸附試驗中,加底物的反應(yīng)步驟需要根據(jù)陰性、陽性對照反應(yīng)情況對反應(yīng)的時間進行調(diào)整。如當(dāng)陰性與陽性對照的反應(yīng)結(jié)果出現(xiàn)后,實驗人員則可以加終止液。有關(guān)資料規(guī)定的時間可能太長或者太短,這樣會對反應(yīng)的結(jié)果產(chǎn)生影響。如果加底物的反應(yīng)時間較長,樣品則有可能呈現(xiàn)陽性,易導(dǎo)致誤診情況的產(chǎn)生。