黃山市分子診斷試劑原材料應(yīng)用領(lǐng)域
發(fā)布時(shí)間：2024-04-29 01:14:50
黃山市分子診斷試劑原材料應(yīng)用領(lǐng)域
大部分分子診斷實(shí)驗(yàn)室的核心技術(shù)都主要集中在檢測(cè)特異性、相對(duì)較短的DNA或RNA片段上。該技術(shù)能診斷傳染性疾病、鑒別影響藥物代謝的特殊基因變異型或檢測(cè)與疾病有關(guān)的基因，如與癌癥有關(guān)的基因。這些檢測(cè)的核心是實(shí)時(shí)定量聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）、轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)擴(kuò)增（TMA）、靶向擴(kuò)增和信號(hào)擴(kuò)增等類(lèi)似技術(shù)的應(yīng)用。桑格排序和DNA片段分析或采用毛細(xì)電泳法的凝膠法都是分子診斷實(shí)驗(yàn)室的關(guān)鍵技術(shù)，但他們通常還包括檢測(cè)過(guò)程中的擴(kuò)增步驟。為了能順利應(yīng)用那些采用DNA和RNA來(lái)診斷疾病的檢測(cè)，分子診斷實(shí)驗(yàn)室須要使用定義明確的工作流程，從而得到穩(wěn)定的、有效的結(jié)果，而當(dāng)前已存在能幫助診斷實(shí)驗(yàn)室實(shí)現(xiàn)每個(gè)工作流程流水化的特殊工具。
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分子診斷主要是應(yīng)用分子生物學(xué)方法檢測(cè)生物體內(nèi)遺傳物質(zhì)的結(jié)構(gòu)或表達(dá)水平的變化而做出診斷的技術(shù)。由于分子診斷可以從基因?qū)哟芜M(jìn)行檢測(cè)，因此檢測(cè)靈敏度和準(zhǔn)確性的優(yōu)勢(shì)較為明顯，可在感染初期識(shí)別病毒或者提早確認(rèn)基因缺陷，從而提供個(gè)性化的醫(yī)療診斷服務(wù)，主要應(yīng)用于遺傳病、傳染性疾病、腫瘤等疾病的檢測(cè)與診斷。分子診斷主要包括 核酸診斷 和 生物芯片技術(shù) 。
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選擇靈敏度高的熱啟動(dòng)Taq酶。一般說(shuō)，Taq酶的擴(kuò)增效率高，靈敏度就高，但也有不一致的情況。如果要擴(kuò)增的樣本目標(biāo)基因豐度較低，建議對(duì)Taq酶的擴(kuò)增靈敏度進(jìn)行檢測(cè)。常見(jiàn)的檢測(cè)方法是將目標(biāo)基因質(zhì)粒片段進(jìn)行10倍或5倍梯度稀釋?zhuān)谳^低的幾個(gè)稀釋度進(jìn)行PCR檢測(cè)，選擇檢測(cè)靈敏度較高的熱啟動(dòng)Taq酶。目前國(guó)內(nèi)市場(chǎng)上常用的ABI、Bioline、Biog的擴(kuò)增靈敏度都比較高，但知名品牌T的靈敏度略低，研究者可根據(jù)自身的實(shí)驗(yàn)要求進(jìn)行選擇。
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熱啟動(dòng)酶是耐高溫的依賴(lài)于DNA模板的DNA聚合酶，來(lái)源于嗜熱的嗜熱水生菌Thermus aquaticus YT一1，一般應(yīng)用于PCR反應(yīng)。TaqDNA聚合酶是一種M92+依賴(lài)酶，反應(yīng)體系中須有Mg2+存在，然而保持適當(dāng)?shù)腗g2+濃度十分重要，因?yàn)镸g2+濃度過(guò)高或過(guò)低均會(huì)影響引物與模板的結(jié)合、模板與PCR產(chǎn)物的解鏈溫度、引物二聚體的形成以及酶的活性與精 確性。
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由于應(yīng)用領(lǐng)域廣泛，分子診斷行業(yè)在全球得到了飛速發(fā)展。隨著靶向治療逐漸成為腫瘤準(zhǔn)確治療的重要方法，釋放更多腫瘤個(gè)性化用藥檢測(cè)（伴隨檢測(cè)）需求。新靶向藥不斷推出和個(gè)性化用藥檢測(cè)滲透率提升，推動(dòng)了個(gè)性化用藥檢測(cè)行業(yè)的快速發(fā)展。基因測(cè)序已在無(wú)創(chuàng)產(chǎn)前檢測(cè)（NIPT）大規(guī)模應(yīng)用，并基于全 面二孩政策推動(dòng)需求快速增長(zhǎng)。未來(lái)隨著技術(shù)進(jìn)步和成本下降，基因測(cè)序在腫瘤早篩和個(gè)人基因組檢測(cè)領(lǐng)域中應(yīng)用前景更廣。