大連市分子診斷試劑原材料應(yīng)用
發(fā)布時間:2024-08-13 01:11:57
大連市分子診斷試劑原材料應(yīng)用
Taq DNA聚合酶具有很高的加工合成特性,在適反應(yīng)溫度時,dNTP的摻入速度為35~100 nt/(s.酶分子),擴(kuò)增長度可達(dá)7.6 kb。在低溫條件下,Taq DNA聚合酶的活性明顯降低,導(dǎo)致此酶在模板內(nèi)局部二級結(jié)構(gòu)區(qū)域的延伸能力受阻或前進(jìn)速率常數(shù)與解離常數(shù)的比值發(fā)生改變。在較高的溫度(95℃以上)時,很少有DNA合成;在體外,DNA在較高溫度時的合成速度受到引物或引物鏈與模板鏈雙鏈結(jié)構(gòu)穩(wěn)定性的限制。由于Taq DNA聚合酶的適反應(yīng)溫度高達(dá)75~80℃,故退火溫度和延伸溫度均可適當(dāng)提高,這限制了非特異性擴(kuò)增產(chǎn)物的出現(xiàn),增加了PCR反應(yīng)的特異性。

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選擇靈敏度高的熱啟動Taq酶。一般說,Taq酶的擴(kuò)增效率高,靈敏度就高,但也有不一致的情況。如果要擴(kuò)增的樣本目標(biāo)基因豐度較低,建議對Taq酶的擴(kuò)增靈敏度進(jìn)行檢測。常見的檢測方法是將目標(biāo)基因質(zhì)粒片段進(jìn)行10倍或5倍梯度稀釋,在較低的幾個稀釋度進(jìn)行PCR檢測,選擇檢測靈敏度較高的熱啟動Taq酶。目前國內(nèi)市場上常用的ABI、Bioline、Biog的擴(kuò)增靈敏度都比較高,但知名品牌T的靈敏度略低,研究者可根據(jù)自身的實驗要求進(jìn)行選擇。

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加強組織領(lǐng)導(dǎo)。地方各級人民政府對轄區(qū)內(nèi)動物防疫工作負(fù)總責(zé),組織有關(guān)部門按照職責(zé)分工,落實強制免疫工作任務(wù)。省級農(nóng)業(yè)農(nóng)村部門具體組織實施強制免疫,各級動物疫病預(yù)防控制機構(gòu)負(fù)責(zé)開展養(yǎng)殖環(huán)節(jié)強制免疫效果評價,各級承擔(dān)動物衛(wèi)生監(jiān)督職責(zé)的機構(gòu)負(fù)責(zé)監(jiān)督檢查養(yǎng)殖場(戶)履行強制免疫義務(wù)情況。落實主體責(zé)任?!吨腥A人民共和國動物防疫法》規(guī)定,飼養(yǎng)動物的單位和個人是免疫主體,承擔(dān)免疫責(zé)任。有關(guān)單位和個人應(yīng)自行開展免疫或向第三方服務(wù)主體購買免疫服務(wù),對飼養(yǎng)動物實施免疫接種,并按有關(guān)規(guī)定建立免疫檔案、加施畜禽標(biāo)識,確保可追溯。

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疫苗:是指用物理或化學(xué)方法將致病微生物殺死或致弱而制成的一種無致病性、有免疫原性的制劑,或者是直接提取致病微生物的免疫原性蛋白或編碼免疫蛋白的基因,利用分子生物學(xué)技術(shù)制成的具有免疫原性而無致病性的制劑。目前的疫苗有病毒(細(xì)菌)死苗、病毒(細(xì)菌)活苗、亞單位苗、基因工程苗等。血清型:是指微生物學(xué)中種以下的一種分 型。因為微生物在種內(nèi)有不同的抗原性,因此可分不同的抗原型或血清型。

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做好免疫記錄。養(yǎng)殖場(戶)要詳細(xì)記錄畜禽存欄、出欄、免疫等情況,特別是疫苗種類、生產(chǎn)廠家、生產(chǎn)批號等信息。鄉(xiāng)鎮(zhèn)動物防疫機構(gòu)、村級防疫員要做好免疫記錄、按時報告,確保免疫記錄與畜禽標(biāo)識相符。落實報告制度。各省份按月報告疫苗采購及免疫情況。在每年3—5月、9—11月春秋兩季集中免疫期間,對免疫進(jìn)展實行周報告制度。各省份要明確專人負(fù)責(zé)匯總、統(tǒng)計免疫信息,按時報中國動物疫病預(yù)防控制中 心。