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天津?qū)崟r熒光定量PCR儀應用

發(fā)布時間:2024-10-05 01:08:52
天津?qū)崟r熒光定量PCR儀應用

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由于應用領(lǐng)域廣泛,分子診斷行業(yè)在全球得到了飛速發(fā)展。隨著靶向治療逐漸成為腫瘤準確治療的重要方法,釋放更多腫瘤個性化用藥檢測(伴隨檢測)需求。新靶向藥不斷推出和個性化用藥檢測滲透率提升,推動了個性化用藥檢測行業(yè)的快速發(fā)展?;驕y序已在無創(chuàng)產(chǎn)前檢測(NIPT)大規(guī)模應用,并基于全 面二孩政策推動需求快速增長。未來隨著技術(shù)進步和成本下降,基因測序在腫瘤早篩和個人基因組檢測領(lǐng)域中應用前景更廣。

天津?qū)崟r熒光定量PCR儀應用

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在動物疫病診斷中,化驗室的操作較為關(guān)鍵,對診斷的結(jié)果有直接的影響。但是,在當前實驗室操作中還存在一-些問題,如檢測操作中、檢測報告中未填寫、不開具《檢測委托書》等這些問題的存在嚴重影響動物疫病的診斷,不利于動物疫病的防控。因此,在今后工作中,需要對相關(guān)工作制度進行不斷地完善,促使化驗室的操作更加規(guī)范化、科學化;加強對實驗室人員的專業(yè)培訓,提高其操作水平。只有這樣才能提高動物疫病檢測的準確性,為我國的動物疫病防控工作做好鋪墊。

天津?qū)崟r熒光定量PCR儀應用

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全球,雖然只有少數(shù)的芯片可用于臨床診斷,但國內(nèi)基因芯片技術(shù)已經(jīng)處于世界領(lǐng) 跑的地位?;蛐酒夹g(shù)將是熒光定量PCR 檢測技術(shù)具挑戰(zhàn)的潛在對手,主要是:熒光定量PCR 技術(shù)一次只能檢測一個或幾個目標基因,而基因芯片技術(shù)可以實現(xiàn)對大量目標基因的同時檢測。隨著人類基因組計劃的進展,基因芯片在國內(nèi)外已成為研發(fā)熱點。若基因芯片技術(shù)迅速成熟并大規(guī)模產(chǎn)業(yè)化,將對熒光定量PCR 檢測產(chǎn)生較大的沖擊。不過,基因芯片的大規(guī)模臨床應用還存在尚未克服的技術(shù)缺陷,主要是由于芯片診斷特異性和靈敏度低、芯片診斷成本高昂和芯片診斷配套儀器價格昂貴等原因,預計熒光定量PCR 檢測技術(shù)在今后5 到10 年內(nèi)可保持前鋒。

天津?qū)崟r熒光定量PCR儀應用

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熱啟動Taq酶的產(chǎn)生:在PCR的反應過程中,主要有三個階段:變性、復性、延伸。Taq DNA聚合酶的復性溫度是72℃,但其在低溫下也有活性(活性較弱),也能催化引物與模板復性,只是錯配率高,發(fā)生非特異性復性機率大。這樣在未達到72℃之前,反應在Taq酶聚合下不斷擴增出非特異性產(chǎn)物,而使實驗失敗。在傳統(tǒng)的PCR反應中,這樣由低溫上升至高溫的過程中,引物錯配和二聚體的形成機率非常高,Hot Start Taq DNA聚合酶就是讓PCR反應一開始就在大于70℃下進行。當溫度較低時,酶活性被封閉,當溫度大于一定溫度時酶又開始工作。這樣就避免了在低溫下復性、延伸的過程,消除引物錯配和二聚體形成,減少非特異性產(chǎn)物的產(chǎn)生。我們是如何對Hotstart Taq酶修飾而讓它只在高溫下才能發(fā)揮活性?這就是Hot Start taq酶的作用原理。