泰州市分子診斷試劑原材料標準
發(fā)布時間：2022-08-21 01:37:15
泰州市分子診斷試劑原材料標準
選擇靈敏度高的熱啟動Taq酶。一般說，Taq酶的擴增效率高，靈敏度就高，但也有不一致的情況。如果要擴增的樣本目標基因豐度較低，建議對Taq酶的擴增靈敏度進行檢測。常見的檢測方法是將目標基因質粒片段進行10倍或5倍梯度稀釋，在較低的幾個稀釋度進行PCR檢測，選擇檢測靈敏度較高的熱啟動Taq酶。目前國內市場上常用的ABI、Bioline、Biog的擴增靈敏度都比較高，但知名品牌T的靈敏度略低，研究者可根據(jù)自身的實驗要求進行選擇。
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由于應用領域廣泛，分子診斷行業(yè)在全球得到了飛速發(fā)展。隨著靶向治療逐漸成為腫瘤準確治療的重要方法，釋放更多腫瘤個性化用藥檢測（伴隨檢測）需求。新靶向藥不斷推出和個性化用藥檢測滲透率提升，推動了個性化用藥檢測行業(yè)的快速發(fā)展?；驕y序已在無創(chuàng)產(chǎn)前檢測（NIPT）大規(guī)模應用，并基于全 面二孩政策推動需求快速增長。未來隨著技術進步和成本下降，基因測序在腫瘤早篩和個人基因組檢測領域中應用前景更廣。
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Taq酶的酶動力與擴增效率有關。一般熱啟動Taq酶的酶動力越強，PCR擴增的指數(shù)增長期越長，‘S型’曲線更加典型，熒光信號值更高，而且更適合做多重PCR檢測。我們曾比較過多家公司的熱啟動Taq酶，在國外品牌中，英國Bioline公司的熱啟動Taq酶，酶動力較好，可做4重PCR，等量起始模板CT30時的熒光信號值高。在國內品牌中，BIOG熱啟動Taq酶的指數(shù)期較長，可做3重PCR，且擴增曲線的‘S’型不受影響，其它的國產(chǎn)品牌一般只能支持2重反應，在做3重反應時，擴增曲線低矮，熒光信號值較低，無典型擴增曲線，結果很難判定。
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全球，雖然只有少數(shù)的芯片可用于臨床診斷，但國內基因芯片技術已經(jīng)處于世界領 跑的地位。基因芯片技術將是熒光定量PCR 檢測技術具挑戰(zhàn)的潛在對手，主要是：熒光定量PCR 技術一次只能檢測一個或幾個目標基因，而基因芯片技術可以實現(xiàn)對大量目標基因的同時檢測。隨著人類基因組計劃的進展，基因芯片在國內外已成為研發(fā)熱點。若基因芯片技術迅速成熟并大規(guī)模產(chǎn)業(yè)化，將對熒光定量PCR 檢測產(chǎn)生較大的沖擊。不過，基因芯片的大規(guī)模臨床應用還存在尚未克服的技術缺陷，主要是由于芯片診斷特異性和靈敏度低、芯片診斷成本高昂和芯片診斷配套儀器價格昂貴等原因，預計熒光定量PCR 檢測技術在今后5 到10 年內可保持前鋒。