牡丹江市分子診斷試劑原材料研發(fā)
發(fā)布時(shí)間:2023-01-08 01:35:20
牡丹江市分子診斷試劑原材料研發(fā)
動(dòng)物傳染病的預(yù)防措施:.①加強(qiáng)科:學(xué)的飼養(yǎng)管理,增強(qiáng)機(jī)體抗病能力。②加強(qiáng)檢疫。對(duì)引種、畜禽集貿(mào)市場(chǎng)、畜禽屠宰場(chǎng)的動(dòng)物及動(dòng)物產(chǎn)品進(jìn)行嚴(yán)格檢疫。嚴(yán)禁染疫動(dòng)物及動(dòng)物產(chǎn)品的流通。對(duì)檢疫時(shí)發(fā)現(xiàn)的染疫動(dòng)物及動(dòng)物產(chǎn)品應(yīng)按國(guó)家的有關(guān)規(guī)定進(jìn)行無(wú)害化處理。③預(yù)防消毒。開展經(jīng)常性的消毒,可以有效地殺滅外界環(huán)境中的病原體,從而達(dá)到預(yù)防傳染病發(fā)生的目的。④預(yù)防接種。通過對(duì)動(dòng)物進(jìn)行免疫接種疫苗,增強(qiáng)其對(duì)某些疫病的特異性抵抗力,是防止動(dòng)物疫病發(fā)生的一個(gè)很重要的有效措施。⑤藥物預(yù)防。在日糧和飲水中加人適量抗生素或驅(qū)蟲藥,以達(dá)到預(yù)防疾病發(fā)生的目的。

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大部分分子診斷實(shí)驗(yàn)室的核心技術(shù)都主要集中在檢測(cè)特異性、相對(duì)較短的DNA或RNA片段上。該技術(shù)能診斷傳染性疾病、鑒別影響藥物代謝的特殊基因變異型或檢測(cè)與疾病有關(guān)的基因,如與癌癥有關(guān)的基因。這些檢測(cè)的核心是實(shí)時(shí)定量聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)、轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)擴(kuò)增(TMA)、靶向擴(kuò)增和信號(hào)擴(kuò)增等類似技術(shù)的應(yīng)用。桑格排序和DNA片段分析或采用毛細(xì)電泳法的凝膠法都是分子診斷實(shí)驗(yàn)室的關(guān)鍵技術(shù),但他們通常還包括檢測(cè)過程中的擴(kuò)增步驟。為了能順利應(yīng)用那些采用DNA和RNA來(lái)診斷疾病的檢測(cè),分子診斷實(shí)驗(yàn)室須要使用定義明確的工作流程,從而得到穩(wěn)定的、有效的結(jié)果,而當(dāng)前已存在能幫助診斷實(shí)驗(yàn)室實(shí)現(xiàn)每個(gè)工作流程流水化的特殊工具。

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熱啟動(dòng)PCR(hot start PCR)是指使Taq DNA 聚合酶只有在樣品溫度至少超過70℃時(shí)才發(fā)揮作用的PCR,可提高反應(yīng)的特異性。Taq DNA 聚合酶通常在比適宜溫度低得多的條件下仍有較強(qiáng)的活性。PCR 反應(yīng)的初加熱過程中,樣品溫度上升到70℃之前,在較低的溫度下引物可能與部分單鏈模板形成非特異性結(jié)合,并在Taq DNA 聚合酶的作用下延伸。結(jié)果會(huì)導(dǎo)致非靶序列的擴(kuò)增,影響反應(yīng)的特異性。熱啟動(dòng)可減少非靶序列的擴(kuò)增,提高反應(yīng)的特異性。在引物設(shè)計(jì)時(shí)如果某位點(diǎn)因?yàn)檫z傳元件的定位而受限,如site-directed 突變、表達(dá)克隆或用于DNA 工程的遺傳元件的構(gòu)建和操作等情況,熱啟動(dòng)PCR 尤為有效。

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熱啟動(dòng)酶是耐高溫的依賴于DNA模板的DNA聚合酶,來(lái)源于嗜熱的嗜熱水生菌Thermus aquaticus YT一1,一般應(yīng)用于PCR反應(yīng)。TaqDNA聚合酶是一種M92+依賴酶,反應(yīng)體系中須有Mg2+存在,然而保持適當(dāng)?shù)腗g2+濃度十分重要,因?yàn)镸g2+濃度過高或過低均會(huì)影響引物與模板的結(jié)合、模板與PCR產(chǎn)物的解鏈溫度、引物二聚體的形成以及酶的活性與精 確性。

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分子診斷是當(dāng)代醫(yī)學(xué)發(fā)展的重要前沿領(lǐng)域之一,其核心技術(shù)是基因診斷,常規(guī)技術(shù)包括:(1)聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR);(2)DNA測(cè)序(DNA sequencing);(3)熒光原位雜交技術(shù)(FISH);(4)DNA印跡技術(shù)( DNA blotting );(5)單核苷酸多態(tài)性(SNP);(6)連接酶鏈反應(yīng)(LCR);(7)基因芯片技術(shù)(gene chip)。